研究人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催化活*的α-澱粉酶A3，並對其進行了研究。回答下列問題：（1）在以...

問題詳情：

研究人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催化活*的α-澱粉酶A3，並對其進行了研究。回答下列問題：

（1）在以澱粉為底物測定A3酶活*時，既可檢測澱粉的減少，檢測應採用的試劑是_________，也可採用斐林試劑檢測________的增加。

（2）在A3的分離過程中可採用聚*烯醯*凝膠電泳檢測其純度，通常會在凝膠中新增SDS，SDS的作用是___________________和___________________。

（3）本實驗中，研究人員在確定A3的最適pH時使用了三種組分不同的緩衝系統，結果如圖所示。某同學據圖判斷，緩衝系統的組分對酶活*有影響，其判斷依據是______________。

（4）在製備A3的固定化酶時，一般不宜採用包埋法，原因是___________________________ （答出1 點即可）。

【回答】

(1). *液    (2). 還原糖（或答：葡萄糖）    (3). 消除蛋白質所帶淨電荷對遷移率的影響    (4). 使蛋白質發生變*    (5). 在pH相同時，不同緩衝系統條件下所測得的相對酶活*不同    (6). 酶分子體積小，容易從包埋材料中漏出

分析】

SDS聚*烯醯*凝膠電泳原理：在離子強度低時，主要以單體形式存在的SDS可以與蛋白質結合，生成蛋白質-SDS複合物。由於SDS帶有大量負電荷，複合物所帶的負電荷遠遠超過蛋白質原有的負電荷，這使得不同蛋白質間電荷的差異被掩蓋。而SDS-蛋白質複合物形狀都呈橢圓棒形，棒的長度與蛋白質亞基分子量有關，所以在SDS聚*烯醯*凝膠電泳中蛋白只存在分子大小的差別，利用這一點可將不同的蛋白質分開 （分子篩效應），因此SDS-PAGE常用於檢測蛋白質亞基的分子量及鑑定純度。

【詳解】（1）測定酶活*時，可以通過檢測反應物的減少或生成物的增加來反映酶活*，所以可以用*液檢測澱粉的減少，也可用斐林試劑檢測還原糖（或葡萄糖）的增加。

（2）鑑定蛋白質純度常用SDS聚*烯醯*凝膠電泳法，凝膠中加入SDS可以消除蛋白質所帶淨電荷對遷移率的影響，並使蛋白質發生變*。

（3）分析題中曲線可知，在pH相同時，不同緩衝系統條件下所測得的相對酶活*不同，可推測緩衝系統的組分對酶活*有影響。

（4）由於酶分子體積小，容易從包埋材料中漏出，所以固定化酶時，一般不採用包埋法。

【點睛】本題比較基礎，考查蛋白質的提取和分離、固定化酶技術等相關知識，對於此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗採用的試劑及試劑的作用、實驗*作步驟等，考生在平時的學習過程中應注意積累。

知識點：酶的應用

題型：綜合題