圖1為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制*內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青黴素抗*...

問題詳情：

圖1為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制*內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青黴素抗*基因，tctR為四環素抗*基因，P為啟動因子，T為終止子，ori為複製原點．已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點．

（1）將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產物用DNA連線酶進行連線後，其中由兩個DNA片段之間連線形成的產物有                、      、      三種．若要從這些連線產物中分離出重組質粒，需要對這些連線產物進行              ．

（2）用上述3種連線產物與無任何抗**的原核宿主細胞進行轉化實驗．之後將這些宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連線產物是    ；若接種到含青黴素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連線產物是                   ．

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是       ，其合成的產物是       ．

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切後產生的末端發生任意連線，酶切時應選用的酶是                         ．

（5）請在圖2中畫出某DNA片段被切割形成黏*末端的過程示意圖．              

．

【回答】

（1）目的基因﹣載體連線物      載體﹣載體連線物      目的基因﹣目的基因連線物      分離純化 

（2）載體﹣載體連線物  目的基因﹣載體連線物

（3）啟動子              RNA

（4）EcoRⅠ和BamHⅠ

（5）

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題