基因表達載體的構建是基因工程的核心.圖1為限制酶EcoRⅠ的識別序列,圖2表示目的基因及限制酶切點,圖3表示目...
問題詳情:
基因表達載體的構建是基因工程的核心.圖1為限制酶EcoRⅠ的識別序列,圖2表示目的基因及限制酶切點,圖3表示目的基因上的DNA片段,圖4表示質粒.請回答下列問題:
(1)若用圖1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA,就其特異*而言,切開的是 之間相連的化學鍵.
(2)圖3為目的基因中的某一片段,下列有關敘述正確的是 .
A.若圖中的ACT能決定一個氨基*,則ACT可稱為一個密碼子
B.DNA聚合酶和DNA連線酶都可作用於②處,解旋酶作用於①處
C.若只用這個片段中的3個鹼基對,排列出的DNA片段有64種
D.就遊離的**基而言,該片段與重組質粒相比多了2個遊離的**基
(3)若利用PCR技術增加目的基因的數量,由圖2可知,A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應選取 作為引物(DNA複製子鏈的延伸方向5′→3′).該DNA分子在PCR儀中經過4次迴圈後會產生等長的目的基因片段 個.
(4)為了使目的基因和質粒定向連線並且有利於受體細胞的篩選,提高重組效率,應該選擇的限制酶是 .如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時對質粒進行切割,假設同時只有任意兩個位點被切斷且每次機會相等,則形成含有完整抗四環素基因的DNA片段有 種.
(5)如果大腸桿菌是受體細胞,則其體內應不含 基因,以利於篩選出含重組質粒的受體菌.目的基因能在大腸桿菌細胞內表達出相同的蛋白質,其遺傳學基礎是 .
【回答】
解:(1)DNA分子的一條多核苷*鏈中,兩個脫氧核苷*之間以**基團和五碳糖相連.由題目可知,EcoRⅠ識別的DNA序列只有G和A,故切開的是鳥嘌呤脫氧核苷*和腺嘌呤脫氧核苷*之間相連的化學鍵.
(2)A、密碼子是mRNA上決定一個氨基*的3個相鄰的鹼基,若圖中的ACT能決定一個氨基*,則其對應的密碼子是UGA,A錯誤;
B、DNA聚合酶和DNA連線酶都可作用於②**二酯鍵處,解旋酶作用中①*鍵處,B正確;
C.A和T之間有2個*鍵,C和G之間有3個*鍵,因此若只用這片段中的3個鹼基對,可以排列出23種片段,C錯誤;
D.就遊離的**基而言,該片段有2個遊離的**基,而重組質粒不含遊離的**基,因此該片段與重組質粒相比多了2個遊離的**基,D正確.
故選:BD.
(3)若利用PCR技術增加目的基因的數量,由圖2可知,DNA複製只能從5’到3’,因此構建前利用PCR技術擴增干擾素基因時,A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應選取 B和C 作為引物,該DNA分子在PCR儀中經過4次迴圈後會產生基因片段16個,其中等長的目的基因片段8個.
(4)為了使目的基因和質粒定向連線並且有利於受體細胞的篩選,提高重組效率,四環素抗*基因沒有被破壞,gu8 應該選擇的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ.如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時對質粒進行切割,假設同時只有任意兩個位點被切斷且每次機會相等,若Pst I酶的切割位點用1表示,EcoR I酶的切割位點用2表示,HindⅢ酶的切割位點用3表示,則形成的DNA片段1→2,2→1,2→3,3→2,1→3,3→1六種片段,其中只有2→1片段含有完整四環素抗*基因,即含有完整四環素抗*基因的DNA片段只有1種.
(5)如果大腸桿菌是受體細胞,則其體內應不含 抗四環素基因 基因,以利於篩選出含重組質粒的受體菌.目的基因能在大腸桿菌細胞內表達出相同的蛋白質,其遺傳學基礎是 各種生物共用一套密碼子.
故*為:
(1)鳥嘌呤脫氧核苷*和腺嘌呤脫氧核苷*
(2)BD
(3)B和C 8
(4)PstⅠ、EcoRⅠ1
(5)抗四環素基因 各種生物共用一套密碼子
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題
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