Ⅰ、下圖1為某種常用質粒的序列圖，LacZ基因編碼的酶能使無*的X－gal變為藍*，Ampr為氨苄青黴素抗*基...

問題詳情：

Ⅰ、下圖1為某種常用質粒的序列圖，Lac Z基因編碼的酶能使無*的X－gal變為藍*，Ampr為氨苄青黴素抗*基因。圖2為目的基因的序列及其相關限制酶的識別序列。請回答下列問題：

（1）若要篩選成功匯入目的基因的重組質粒，培養基中應加入的物質有　　　　　　　　

和　　　　。

（2）實驗小組用BamHⅠ和BglⅡ兩種限制酶切割目的基因和質粒，構建重組質粒後匯入大腸桿菌中。在篩選重組質粒的培養基上，若大腸桿菌菌落顯藍*，說明匯入了　　　　　　　。沒有匯入任何外源DNA的大腸桿菌　　　　。（填“能”或“不能”)在該培養基上生存。

（3）將若干個質粒和目的基因用BamHⅠ和BglⅡ兩種限制酶切割後，用DNA連線酶相連，然後再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功連線後的產物，獲得了長度為0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四種長度的DNA片段，則目的基因的長度為　　　　kb(己知目的基因的長度大於1kb，1kb＝1000個鹼基對)。

Ⅱ、pBV220質粒是被廣泛應用的大腸桿菌載體，結構如下圖所示。其中PRPL是啟動子，rrB是基因轉錄終止訊號，Ampr是氨苄青黴素抗*基因，ori是質粒複製起點，EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、PstⅠ均為限制*內酶。回答下列問題：

（1）將目的基因與此質粒構建基因表達載體時，通常用圖中　　　　　　　　兩種限制酶切割此質粒，其優點是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。用這兩種酶可以切開此質粒的　　　　個**二酯鍵。

（2）目的基因是否成功匯入大腸桿菌，首先用到的檢測方法是                      。

【回答】

Ⅰ、（1）氨苄青黴素　　　　X－gal

（2）空質粒（或沒有*入目的基因的質粒）　　　　不能

（3）1.8

Ⅱ、（1）EcoRⅠ、HindⅢ（答全得分）　　　　可防止質粒自身環化　　　　4

（2）DNA分子雜交技術

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題