圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制*內切酶EcoRI、BamHI、SamI的酶切位點，P為啟動子，...

問題詳情：

圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制*內切酶EcoRI、BamHI、SamI的酶切位點，P為啟動子，T為終止子，ori為複製原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI、SamI在內的多種酶的酶切位點。外源DNA*入到ampR或tctR中會導致相應的基因失活（ampR表示氨苄青黴素抗*基因，tctR表示四環素抗*基因）。回答下列問題：

（1）目的基因主要是指編碼蛋白質的基因，也可以是一些         。在基因工程中使用的載體除質粒外，還有           、動植物病毒等，它們來源不同，在大小、結構、複製以及*入片段大小上也有很大差別。

（2）一般為避免在構建重組質粒時出現自身環化，該質粒用限制酶切割時應該用        酶進行切割，切割過程中消耗了           個水分子。目的基因進入受體細胞內，並在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱之為                     。構建出來的基因表達載體在受體細胞內表達時，RNA聚合酶識別和結合位點是            。

（3）若將此質粒用EcolR I酶切割後，與用EcolR I酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連線酶進行連線反應，用得到的混合物直接轉化大腸桿菌（大腸桿菌本身不含該質粒），結果大腸桿菌有的未被轉化，有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種，分別是含有環狀目的基因、含有質粒載體、含有*入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌。其中，可在含氨苄青黴素的培養基上生存下來的大腸桿菌是            ，能在同時含氨苄青黴素和四環素的培養基上生存的是              。

（4）假如該質粒載體為來自土壤農桿菌的Ti質粒，將其攜帶的抗蟲基因整合到某植物細胞的染*體DNA上，將該細胞通過植物組織培養技術培育成植株後，發現其並無抗蟲特*，其可能的原因是          （答出1種情況即可）

【回答】

     （1）具有調控作用的因子    λ噬菌體的衍生物  

     （2）EcoRI、BamHI酶（2分）   4（2分）     轉化（2分）     啟動子（或P）

     （3）含有質粒載體和含有*入了目的基因的重組質粒的    含有質粒載體

     （4）抗蟲基因並未表達（或未轉錄或未翻譯）；抗蟲基因表達的水平極低或產生的抗蟲蛋白沒有活*（2分）

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題