某質粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環素基因和抗氨苄青黴素基因。利用此...

問題詳情：

某質粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環素基因和抗氨苄青黴素基因。利用此質粒獲得轉基因抗鹽菸草的過程如圖所示，請回答下列問題。

 (1)將抗鹽基因匯入菸草細胞內，使菸草植株產生抗鹽*狀，這種新*狀(變異*狀)的來源屬於                         。

(2)在構建重組質粒時，應選用          和         （填SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ）兩種酶對質粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保*重組DNA序列的唯一*。

 (3)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出匯入了重組質粒的農桿菌，上圖表示運用影印培養法(使一系列培養皿的相同位置上能出現相同菌落的一種接種培養方法)檢測基因表達載體是否匯入了農桿菌。培養基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養基A和培養基B分別還含有                   、                   。

從檢測篩選的結果分析，含有目的基因的是___    __（填序號）菌落中的細菌。為了確定抗鹽菸草是否培育成功，既要用放**同位素標記的             作探針進行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌菸草植株的方法從個體水平鑑定菸草植株的耐鹽*。

(4)將轉入抗鹽基因的菸草細胞培育成完整的植株需要用                     技術，愈傷組織經細胞的增殖和分化進而形成完整植株，此過程除營養物質外還必須向培養基中新增                                 。

⑸下圖表示該抗蟲水稻主要培育流程，據圖回答：

組建理想的載體需要對天然的質粒進行改造。下圖是天然土壤農桿菌Ti質粒結構示意圖(圖示部分基因及部分限制*內切酶作用位點)，據圖分析：

①人工改造時，要使抗蟲基因表達，還應*入                         。

②人工改造時用限制酶Ⅱ處理，其目的之一是去除質粒上的                 (基因)，保*T－DNA進入水稻細胞後不會引起細胞的無限*和生長。

③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過的理想質粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，並構成重組Ti質粒。分別以含四環素和卡那黴素的培養基培養已成功匯入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的現象是                                                。

【回答】

 (1) 基因重組        

(2) SalⅠ、Hind Ⅲ（兩個都答對給1分）

(3) 氨苄青黴素　    四環素(氨苄青黴素和四環素)   　4和6     　抗鹽基因　

(4) 植物組織培養　          　植物激素(生長素和細胞*素)

(5) ①啟動子         ②tms和tmr（答全給分，多答tet，不扣分）　

③在含卡那黴素的培養基中能夠生長，而在含四環素的培養基中不能生長

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題