多聚半乳糖醛*酶(PG)能降解果膠使細胞壁破損。成熟的番茄果實中,PG合成顯著增加,能使果實變紅變軟,但不利於...
問題詳情:
多聚半乳糖醛*酶(PG)能降解果膠使細胞壁破損。成熟的番茄果實中,PG合成顯著增加,能使果實變紅變軟,但不利於保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達,可延長果實保質期。科學家將PG基因反向接到Ti質粒上,匯入番茄細胞中,得到轉基因番茄,具體*作流程如下圖。據圖回答下列問題:
(1)若已獲取PG的mRNA,可通過________獲取PG基因。重組質粒轉移到大腸桿菌中的目的是____________。
(2)用含目的基因的農桿菌感染番茄原生質體後,可用含有________的培養基進行篩選,理由是______________。之後,還需將其置於質量分數為25%的蔗糖溶液中,觀察細胞________現象來鑑別細胞壁是否再生。
(3)由於匯入的目的基因能轉錄出反義RNA,且能與________互補結合,因此可抑制PG基因的正常表達。若________,則可確定轉基因番茄培育成功。
(4)將轉入反向連結PG基因的番茄細胞培育成完整的植株,需要用________技術;其中,愈傷組織經________形成完整植株,此過程除營養物質外還必須向培養基中新增____________________。
【回答】
(1)PG的mRNA在逆轉錄酶的作用下,逆轉錄為PG基因。重組質粒轉移到大腸桿菌中,目的是大量複製目的基因。(2)根據圖示,PG基因*在四環素抗*基因中間,在BamHⅠ酶作用下,四環素抗*基因被破壞了,即重組質粒中含卡那黴素抗*基因,但不含四環素抗*基因,故含有PG基因的農桿菌感染番茄原生質體後,可用含有卡那黴素的培養基進行篩選。若將其置於質量分數為25%的蔗糖溶液中,可通過觀察細胞是否發生質壁分離現象來鑑別細胞壁是否再生。(3)根據圖示,匯入的目的基因能轉錄出PG反義RNA,天然PG基因轉錄產生正常的RNA,這兩種RNA能互補結合,從而抑制了PG基因的正常表達。若番茄果實的保質期延長,則確定轉基因番茄培育成功。(3)利用植物組織培養技術,將該轉基因番茄培育成植株。其中,愈傷組織經再分化形成完整植株。此過程除營養物質外,還必須向培養基中新增植物激素。
*:(1)逆轉錄法 大量複製目的基因(或克隆目的基因)
(2)卡那黴素 重組質粒中含卡那黴素抗*基因而四環素抗*基因被破壞 是否發生質壁分離
(3)天然的PG基因轉錄的mRNA 番茄果實的保質期延長
(4)植物組織培養 再分化(或細胞增殖和分化) 植物激素(生長調節劑、生長素和細胞*素)
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題
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