圖1為三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖．圖中Ap為氨苄青黴素抗*基因，Tc為四環素抗*基因，lacZ為藍...

問題詳情：

圖1為三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖．圖中Ap為氨苄青黴素抗*基因，Tc為四環素抗*基因，lacZ為藍*顯*基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點與複製原點的距離，1Kb=1000個鹼基對長度．請據圖回答：

（1）質粒A、C不能作為目的基因運載體的理由分別是　                   　、　                       　．

（2）如果是兩兩重組，可能有　  　種長度的重組結果．

（3）基因工程中檢測篩選含有目的基因的重組質粒是一個重要的步驟．現運用　    　酶切質粒，完全酶切後進行電泳觀察，若出現長度為1.1kb和　    　kb，或者　     　kb

和　     　kb的片段，則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功（重組質粒上目的基因的*入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的鹼基對忽略不計）．

（4）將篩選含有目的基因的重組質粒匯入大腸桿菌的載體可以是　     　（多選）．

A．質粒         B．動物病毒        C．噬菌體       D．植物病毒

（5）為了篩選出成功匯入重組質粒的大腸桿菌，首先將大腸桿菌在培養基上培養，得到如圖示2的菌落．再將滅菌絨布按到培養基上，使絨布面沾上菌落，然後將絨布按到含　   　的培養基上培養，得到如圖3的結果（空圈表示與圖2對照無菌落的位置），挑選目的菌的位置為　                          ．

【回答】

解：（1）由圖可知，質粒A中缺少標記基因，質粒C中的複製原點被酶切割，所以A、C不能作為運載體．

（2）用DNA連線酶連線時，可能出現質粒環化、目的基因環化、形成重組質粒，有3種長度的結果．

（3）根據題意，質粒長度為2.7kb，目的基因長度為4.0kb，所以重組質粒長度為6.7kb，出現長度為1.1kb，則另一個長度為5.6kb，若目的基因重組時倒置，可形成3.1kb和3.6kb的片段．

（4）基因工程中常用的運載體有質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒，故匯入大腸桿菌的載體可以是質粒和噬菌體．

（5）為了篩選出成功匯入重組質粒的大腸桿菌，首先將大腸桿菌在培養基上培養，得到如圖乙的1的菌落說明質粒已經匯入．再將滅菌絨布按到培養基上，使絨布面沾上菌落，然後將絨布按到含氨苄青黴素的培養基上培養，得到如圖乙的2的結果，無菌落的位置表示不抗氨苄青黴素，說明為重組質粒，故挑選目的菌的位置為圖1培養基中對應圖2中消失的菌落．

故*為：

（1）缺少標記基因    複製原點被限制酶切割

（2）3

（3）EcoRⅠ5.6       3.1       3.6

（4）A C

（5）氨苄青黴素      圖1培養基中對應圖2中消失的菌落

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題