生長激素製劑是治療侏儒症的特效*。利用基因工程讓大腸桿菌合*類的生長激素,部分流程如圖所示(注:Ampr為氨...
問題詳情:
生長激素製劑是治療侏儒症的特效*。利用基因工程讓大腸桿菌合*類的生長激素,部分流程如圖所示(注:Ampr為氨苄青黴素抗*基因,Tetr為四環素抗*基因,Ori是複製原點;EcoRⅠ、BglⅡ、ClaⅠ表示限制酶)。回答下列問題。
(1)EcoRⅠ識別的鹼基序列是GAATTC,該序列中有____________個嘌呤。切割圖中的目的基因時不能選擇EcoRⅠ,理由是____________。
(2)將重組質粒匯入大腸桿菌時,常選用____________處理大腸桿菌,使其成為感受態細胞。該狀態的細胞具有____________的特*。
(3)利用標記基因篩選含重組質粒的大腸桿菌時,所用培養基中需新增____________(填“氨苄青黴素”或“四環素”),理由是____________。該基因工程所用的大腸桿菌細胞內本身不能攜帶____________基因,否則篩選出的大腸桿菌細胞內不一定有目的基因。
【回答】
6 該酶識別的序列在目的基因中間,會破壞目的基因 Ca2+ 易從外界環境吸收DNA 氨苄青黴素 重組質粒中有氨苄青黴素抗*基因,而四環素抗*基因被破壞 氨苄青黴素抗*
【分析】
基因工程*作的工具是限制*內切酶、DNA連線酶和運載體;基因工程*作的步驟為提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因匯入受體細胞、目的基因的檢測與表達。目的基因的檢測有多種手段,如①DNA分子雜交技術;②分子雜交技術;③抗原-抗體雜交技術。2、標記基因結構完整,則能在對應培養基中生長。
【詳解】
(1EcoRⅠ識別的鹼基序列應為含有6個鹼基對的雙鏈DNA片段,根據鹼基互補配對原則,其*有6個嘌呤;圖中生長激素基因是目的基因,而該基因中有EcoRⅠ識別的序列,使用該酶切割會破壞目的基因,故不能選擇EcoRⅠ切割目的基因。
(2)大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是:用Ca2+處理大腸桿菌細胞,改變細胞膜的通透*,使之成為感受態細胞;該狀態的細胞易從外界環境吸收DNA。
(3)利用標記基因篩選含重組質粒的大腸桿菌時,四環素抗*基因被破壞,而重組質粒中有氨苄青黴素抗*基因,因此,培養基中應新增的抗生素是氨苄青黴素;故為達到篩選目的,該基因工程所用的大腸桿菌細胞內本身不能攜帶氨苄青黴素基因。
【點睛】
本題考查基因工程的相關知識,解答本題的關鍵是掌握基因工程的原理、*作工具及*作步驟,能正確分析題圖,同時能結合圖中資訊準確答題。
知識點:基因工程
題型:綜合題
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