融合PCR技術是採用具有互補末端的引物，將不同來源的擴增片段連線起來的方法，其過程如下圖1所示。下圖2是中間載...

問題詳情：

融合PCR技術是採用具有互補末端的引物，將不同來源的擴增片段連線起來的方法，其過程如下圖1所示。下圖2是中間載體1和中間載體2（利用融合PCR技術構建成）構建成葉綠體定點整合表達載體示意圖（限制酶酶切位點標註於載體外側），葉綠體定點整合表達載體通過與葉綠體基因的同源重組，將目的基因整合於葉綠體DNA上的特定位點上。請據圖回答下列問題。

（1）圖1第一階段中PCR至少進行____________次迴圈，才能獲得雙鏈等長的DNA，第二階段中引物2與引物3部分鹼基的____________關係使得兩DNA能成功“搭橋”連線起來。

（2）若通過融合PCR技術將啟動子、標記基因、目的基因、終止子拼接起來，需要設計__________種引物，其中能夠起著“搭橋”作用的引物有__________種。

（3）圖2中需使用_________________（填限制酶）和DNA連線酶將兩中間載體構建成定點整合表達載體，途中定點整合表達載體上未標出的結構是__________。

（4）葉綠體定點整合表達載體中_____________________________________________（填基因）能使目的基因準確*入葉綠體DNA上的特定位點上。與利用農桿菌轉化法相比，利用定點整合表達載體將目的基因匯入葉綠體中的優點是____________________________________。

【回答】

（1）2    互補配對

（2）8    6

（3）Spe I、Sal I       複製原點

（4）葉綠體同源重組基因1和葉綠體同源重組基因2

能實現定點整合到葉綠體中，且不易隨花粉擴散帶來安全問題

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題