多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。請回答下列有關PCR技術的基本原理及應用問題。(...
問題詳情:
多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。請回答下列有關PCR技術的基本原理及應用問題。
(1)DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將__________的末端稱為5′端,當引物與DNA母鏈通過鹼基互補配對結合後,DNA聚合酶就能從引物的__________開始延伸DNA鏈。
(2)PCR利用DNA的熱變*原理解決了開啟DNA雙鏈的問題,但又導致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀80年代,科學家從一種Taq細菌中分離到__________,它的發現和應用解決了上述問題。要將Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來,所用的培養基叫__________。
(3)PCR的每次迴圈可以分為__________三步。假設在PCR反應中,只有一個DNA片段作為模板,請計算在5次迴圈後,反應物中大約有__________個這樣的DNA片段。
(4)請用簡圖表示出一個DNA片段PCR反應中第二輪的產物。
(5)簡述PCR技術的主要應用。
【回答】
【解析】 (1)DNA聚合酶只能把新的核苷*加到已經存在的核*的3′羥基上,與DNA母鏈結合的RNA引物就提供這個羥基。(2)因PCR利用了DNA的熱變*原理解決了開啟DNA雙鏈的問題,所以用於催化DNA複製過程的DNA聚合酶要具有耐高溫的特*。用選擇培養基可將Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來。(3)DNA複製兩條鏈均作為模板,進行半保留式複製,所以複製5次後得到的子代DNA分子數為25=32個。(4)新合成的DNA鏈帶有引物,而最初的模板DNA的兩條鏈不帶有引物。(5)PCR技術可以對DNA分子進行擴增,所以可用於遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學、基因克隆和DNA序列測定等方面。
【*】 (1)**基團 3′端
(2)耐高溫的TaqDNA聚合酶 選擇培養基
(3)變*、復*和延伸 32
(4)
(5)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學、基因克隆和DNA序列測定等。(要求3項以上)
知識點:生物技術在食品加工及其他方面的應用
題型:填空題
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