已知新冠病毒為RNA病毒,該病毒表面蛋白A為主要抗原,由病毒的A基因控制合成。現利用單株抗體的製備技術來生產...
問題詳情:
已知新冠病毒為RNA病毒,該病毒表面蛋白A為主要抗原,由病毒的A基因控制合成。現利用單株抗體的製備技術來生產預防和診斷新冠病毒的疫苗和抗體。回答下列問題:
(1)新冠病毒合成蛋白A的場所是____。基因工程技術構建的A基因表達載體中啟動子能被受體細胞中的____所識別,進而催化A基因的轉錄。
(2)將製備的A蛋白重複注*到小鼠皮下細胞,目的是獲得更多的____細胞。然後將該種細胞與體外培養的小鼠骨髓瘤細胞按一定比例加入試管中,再加入 ___誘導細胞融合。細胞融合後,融合體系中除了含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,還可能含有___。
(3)經細胞融合獲得的雜種細胞,還需進行____,才能得到所需的雜交瘤細胞。在將雜交瘤細胞進行擴大培養之前,還需要進行 ___。
(4)在雜交瘤細胞體外培養過程中,通常採用培養皿或鬆蓋培養瓶,將其置於含95%空氣與5%二氧化碳的混合氣體培養箱中進行培養,從氧氣和二氧化碳的作用角度分析,這樣做的目的是___。
【回答】
宿主細胞的核糖體 RNA聚合酶 漿 聚乙二醇/PEG 骨髓瘤細胞與漿細胞各自自身融合的細胞 選擇*培養 抗體檢測 氧氣是細胞進行有氧呼吸所必需的,二氧化碳用於維持培養液pH相對穩定
【分析】
基因表達載體的組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因。
(1)啟動子:是一段有特殊結構的DNA片段,位於基因的首端,是RNA聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質。 (2)終止子:也是一段有特殊結構的DNA片段,位於基因的尾端。 (3)標記基因的作用:是為了鑑定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素抗*基因。
單株抗體製備流程:先給小鼠注*特定抗原使之發生免疫反應,之後從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養,即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養;最後從培養液或小鼠腹水中獲取單株抗體。
【詳解】
(1)新冠病毒屬於專*寄生的生物,其蛋白質A合成場所是宿主細胞的核糖體上,啟動子位於基因的首端,是RNA聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出mRNA。
(2)將製備的A蛋白(相當於抗原)重複注*到小鼠皮下細胞,可引起小鼠的特異*免疫,目的是獲得更多的能產生抗蛋白質A抗體的漿細胞。將該種細胞與體外培養的小鼠骨髓瘤細胞按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導細胞融合。由於細胞融合是隨機的,所以細胞融合後,融合體系中除了含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,還可能含有骨髓瘤細胞與漿細胞各自自身融合的細胞。
(3)經細胞融合得到的雜種細胞需要進行選擇*培養才可得到雜交瘤細胞,在將雜交瘤細胞進行擴大培養之前,還需要進行抗體檢測,獲得能產生特異*抗體的雜交瘤細胞。
(4)在雜交瘤細胞體外培養過程中,培養液中的氧氣是細胞進行有氧呼吸所必需的,而二氧化碳則用於維持培養液pH相對穩定。
【點睛】
本題考查基因工程、單株抗體的製備和動物細胞培養的相關內容,屬於教材基礎知識的考查,意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點,把握知識間內在聯絡的能力;能運用所學知識,解決生物學問題的能力。
知識點:新冠肺炎
題型:綜合題
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