基因敲除是應用DNA重組原理髮展起來的一門新興技術。“基因敲除細胞”的構建過程如下:第一步:從小鼠囊胚中分離...
問題詳情:
基因敲除是應用DNA重組原理髮展起來的一門新興技術。“基因敲除細胞”的構建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎幹細胞(ES),在培養基中擴增。這些細胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構建基因表達載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新黴素抵抗基因)等。由於同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能將表達載體準確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達載體匯入胚胎幹細胞,並與其內靶基因同源重組,完成胚胎幹細胞的基因改造。
第四步:基因改造後的胚胎幹細胞增殖、篩選。基本原理如下圖所示。
請根據上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因匯入受體細胞前,應首先完成 ,在這過程中所需要的工具酶是 。
(2)如果要獲得一隻含目的基因的小鼠,則選擇的受體細胞通常是 。若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為 細胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)(2)中獲得的小鼠,通過有*生殖產生的後代是否都含該目的基因? 。為什麼? 。
【回答】
(1)表達載體的構建 限制*核*內切酶(答限制酶也給分)和DNA連線酶
(2)受精卵 感受態
(3)作為標誌基因,便於篩選
(4)否 在形成生殖細胞時等位基因(目的基因和靶基因)會發生分離
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題
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