如圖所示為血紅蛋白提取和分離的部分裝置,回答下列問題。(1)在進行樣品處理時首先要對紅血球進行洗滌,目的是
問題詳情:
如圖所示為血紅蛋白提取和分離的部分裝置,回答下列問題。
(1)在進行樣品處理時首先要對紅血球進行洗滌,目的是_______________。紅血球破碎後,通過_________________法將血紅蛋白從混合液中分離出來,圖*所示為分離結果。若紅血球洗滌次數過少,則圖*結果可能會_____________。
(2)圖乙裝置可用於_________過程。現有一定量的血紅蛋白溶液,進行上述*作時若要儘快達到理想的實驗效果,可以_____________________(寫出一種方法)。
(3)通過凝膠*譜法將樣品進一步純化,最後經SDS—聚*烯醯*凝膠電泳進行純度鑑定。凝膠*譜法是根據_________________分離蛋白質的方法。加人SDS可以使蛋白質在聚*烯醯*凝膠中的遷移率完全取決於_________________。
【回答】
去除雜蛋白(血漿蛋白),以利於後續步驟的分離純化 低速短時間離心 分層不明顯 透析(粗分離) 增加緩衝液的量(或及時更換緩衝液) 相對分子質量大小 分子的大小
【解析】
血紅蛋白的提取和分離流程為:紅血球的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析→凝膠*譜柱的製作→凝膠*譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫。
【詳解】
(1)洗滌紅血球的目的是去除雜蛋白(血漿蛋白),以利於後續步驟的分離純化。紅血球破碎後可以採用低速短時間離心的方法將血紅蛋白從混合液中分離出來。若紅血球洗滌次數過少,血漿蛋白可能未被除淨,導致離心分層時各種成分分層不明顯。
(2)圖乙裝置可用於透析過程,若要儘快達到理想的實驗效果,則可採用增加緩衝液的量或及時更換緩衝液的方法。
(3)①凝膠*譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質的方法。②加入SDS可以使蛋白質在聚*烯醯*凝膠中的遷移率完全取決於分子的大小。
【點睛】
凝膠*譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法,相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道,路程長,移動的速度慢,相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道,路程短,移動的速度快,因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離。
知識點:DNA和蛋白質技術
題型:綜合題
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