我國是大豆的原產地,但目前我國大豆嚴重依賴進口。大豆細胞中與油脂合成相關酶的基因有DGAT2、FAD2、FAD...
問題詳情:
我國是大豆的原產地,但目前我國大豆嚴重依賴進口。大豆細胞中與油脂合成相關酶的基因有DGAT2、FAD2、FAD3、KASⅠ、KASⅡ,它們通過控制多種酶的合成來控制油脂合成。採用基因工程育種能大幅度快速改良大豆品質。研究人員通過RACE技術獲得轉錄因子WRI1,並將其在大豆中過量表達,結果顯示轉基因後代含油量比普通大豆提高8%以上,油*和亞油*的含量也顯著提高了。
(1)RACE技術(cDNA末端快速擴增技術)是一種基於PCR技術的,利用低丰度的轉錄本(由一個基因轉錄形成的一種或多種mRNA)快速擴增cDNA的有效方法,理論上通過此技術獲取大量目的基因需經 和 兩個基本過程。
(2)在大豆內過量表達轉錄因子WRIl即可提高大豆含油量,表明WRIl基因在細胞內發揮的作用是 。
(3)質粒P0具有四環素抗*基因(tetr)和氨苄青黴素抗*基因(ampr),對其進行酶切時應注意 ,以便篩選重組DNA.研究人員所選限制酶EoRV的酶切位點為…GAT↓ATC…,經其酶切後的片段還需經酶處理為 未端才能與目的基因連線。研究人員構建基因表達載體時往往使用產生後一種末端的限制酶,你認為這樣做的理由是 。
(4)匯入重組質粒的細胞還需經過 和 才能形成植株,在此過程中, 的協同調控作用非常重要。
【回答】
(1)逆轉錄 (DNA)複製
(2)調控(增強)DGAT2、FAD2、FAD3、KASI、KASII等基因的表達,促進油脂合成
(3)所選限制酶的識別序列不能同時存在tetr和ampr中(不同同時酶切tetr和ampr) 黏* 相同黏*末端通過鹼基互補能促進連線過程加快反應速度(或DNA連線酶連線黏*末端的效率高於連線平末端)
(4)脫分化 再分化 生長素和細胞*素
【分析】基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細胞中穩定高效地表達。為了實現基因工程的目標,通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素,並按照一定的程式進行*作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA匯入受體細胞也稱(宿主)細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。
【解答】(1)cDNA是mRNA逆轉錄得到的,快速擴增cDNA,理論上需經逆轉錄和(DNA)複製兩個基本過程。
(2)大豆細胞中與油脂合成相關酶的基因有DGAT2、FAD2、FAD3、KASⅠ、KASⅡ,它們通過控制多種酶的合成來控制油脂合成。在大豆內過量表達轉錄因子WRIl即可提高大豆含油量,表明WRIl基因在細胞內發揮的作用是調控(增強)DGAT2、FAD2、FAD3、KASI、KASII等基因的表達,促進油脂合成。
(3)質粒P0具有四環素抗*基因(tetr)和氨苄青黴素抗*基因(ampr),對其進行酶切時應注意所選限制酶的識別序列不能同時存在tetr和ampr中(不同同時酶切tetr和ampr),否則標記基因都被破壞,無法進行後續重組DNA的篩選。研究人員所選限制酶EoRV的酶切位點為…GAT↓ATC…,經其酶切後的片段還需經酶處理為黏*未端才能與目的基因連線(圖示中目的基因含黏*末端)。相同黏*末端通過鹼基互補能促進連線過程加快反應速度(或DNA連線酶連線黏*末端的效率高於連線平末端),因此研究人員構建基因表達載體時往往使用產生後一種末端(黏*末端)的限制酶。
(4)匯入重組質粒的細胞(分化的體細胞)還需經過脫分化(形成愈傷組織)和再分化(分化出相應的器官、組織)才能形成植株。在此過程中,生長素和細胞*素的協同調控作用非常重要。
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知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:綜合題
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