人溶菌酶(hLTF)是人乳汁中重要的抗菌蛋白。某團隊將hLTF基因連線到質粒載體中構建了hLTF基因表達載體,...
問題詳情:
人溶菌酶(hLTF)是人乳汁中重要的抗菌蛋白。某團隊將hLTF基因連線到質粒載體中構建了hLTF基因表達載體,通過構建轉基因羊乳腺生物反應器生產抗菌蛋白。請回答:
(1)為實現hLTF基因的大量擴增,可利用圖中的引物____組合進行PCR。為保*hLTF基因和表達載體的充分連線,PCR擴增時,應在基因上、下游引物的端分別新增相應的酶切位點,且常在兩條引物上設計加入不同的限制酶酶切位點,主要目的是___________。
(2)Cre/loxp位點特異*重組系統可實現轉基因受體細胞染*體(DNA)上基因的定點整合和重組。重組酶Cre能識別特異的DNA序列,即loxP位點,使loxP位點間的基因序列被刪除或重組,Cre/loxp介導三種不同的重組反應。
①loxP位點是一段DNA序列,包括兩個反向重複序列和一個不對稱的間隔區組成反向重複序列是Cre重組酶的特異識別位點,而間隔區域決定了loxP位點的方向。Cre酶能特異*地識別反向重複序列並在特定位置切開**二酯鍵,其功能類似於基因工程中的_________酶。
②如果三種重組反應均發生在染*體上,可能會導致染*體上基因的_________,重組反應的結果取決於_____________。
(3)構建乳腺生物反應器的方法有多種,一是通過轉基因技術將重組基因匯入到受精卵中,使其生長髮育成轉基因動物:二是通過轉基因體細胞核移植技術生產克隆動物作為生物反應器。兩種方法獲得的胚胎都要藉助_____技術和_____技術才能獲得轉基因動物個體。
【回答】
(1)②③ 5’ 使DNA片段能定向*入表達載體,減少自連
(2)①限制酶 ②缺失、倒位和易位 loxP位點的位置、同一染*體(DNA)上loxP位點的方向
(3)早期胚胎培養 胚胎移植
知識點:現代生物科技 單元測試
題型:綜合題
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