為探究M基因的功能，科研人員將克隆得到的M基因匯入擬南芥植株(自交繁殖)，流程如圖所示。回答下列問題：(1)通...

問題詳情：

為探究M基因的功能，科研人員將克隆得到的M基因匯入擬南芥植株(自交繁殖)，流程如圖所示。回答下列問題：

(1)通過過程a、b，採用________________________法來獲得大量的M基因，過程b中需先加熱至90～95 ℃然後冷卻至55～60 ℃，冷卻的目的是________________________________________________________________。

(2)為獲得轉基因植物，採用________法侵染擬南芥的花序。基本過程如下：

①過程d：將重組質粒匯入大腸桿菌，其目的是________________。

②過程e：將重組質粒匯入農桿菌，再將含有重組質粒的農桿菌離心、富集，得到含有M基因的農桿菌液。

③過程f：在擬南芥植株產生大量花序時，將其花表面部分在農桿菌懸浮液中浸泡20～30 s，3～4周後得到轉化擬南芥植株的種子(T0)。浸泡之前，需先剪去已經長成的角果(這些角果將來可發育成種子)，原因是                   

________________________________________________________________。

④將收穫的擬南芥T0種子，播種在含有________的培養基上，能健康生長的幼苗含有________________。

(3)採用農桿菌花序侵染的方法轉化，一般只能將目標片段整合到一條DNA上。若要獲得M基因穩定的突變體，需________篩選出能穩定遺傳的突變體。

【回答】

(1)反轉錄法(逆轉錄法)和PCR　使引物結合到互補DNA鏈上

(2)農桿菌轉化　獲取大量重組質粒(讓目的基因擴增)　這些已受精的角果將來結的種子是非轉基因的　卡那黴素　M(目的)基因

(3)將T0代連續自交

解析　(1)圖示中由已知RNA獲取目的基因的方法是反轉錄法(逆轉錄法)，對目的基因進行擴增採用的是PCR技術。進行PCR時需加熱至90～95 ℃然後冷卻至55～60 ℃，冷卻的目的是使引物結合到互補DNA鏈上。(2)圖示中將基因表達載體構建完成後沒有直接匯入農桿菌，而是先將其匯入大腸桿菌，目的是利用大腸桿菌的增殖來獲取大量重組質粒(讓目的基因擴增)。適合轉化植株的花卉應沒有成熟，也沒有產生已受精的角果。因為這些已受精的角果將來結的種子肯定是非轉基因的，如果不剪掉的話會降低轉化率，不利於後續*作。由於質粒中含有卡那黴素抗*基因，成功轉入重組質粒的種子能夠在卡那黴素培養基上正常生長，非轉基因種子不能正常生長，一般萌發後死亡。(3)由於農桿菌介導的花序浸染法一般只能將目標片段整合到一條DNA上，為篩選出能穩定遺傳的突變體，可將T0代連續自交。

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：綜合題