獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取的方式也多種多樣。從基因文庫中直接獲取和利用PCR技術擴增就是兩種常用...
問題詳情:
獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取的方式也多種多樣。從基因文庫中直接獲取和利用PCR技術擴增就是兩種常用的方式,回答下列問題:
(1)基因文庫中cDNA文庫與基因組文庫相比,前者較小,原因是_________。
(2)PCR過程所依據的原理是_______________,擴增過程需要加入_______________酶。
(3)構建基因表達載體時,目的基因的首端必須含有________,它的作用是___________。
(4)將目的基因匯入到植物細胞中有多種方法,請寫出兩種_________________________。
【回答】
(1). cDNA文庫是通過某種生物發育的某個時期mRNA反轉錄產生的,在這個時期並不是每個基因都進行轉錄,而基因組文庫包含該生物所有的基因 (2). DNA雙鏈複製 (3). 耐高溫的DNA聚合(Taq酶) (4). 啟動子 (5). 作為RNA聚合酶識別並結合的部位,啟動轉錄過程 (6). 農桿菌轉化法、花粉管通道法
【解析】試題分析:基因組文庫是指包含某種生物所含有的全部基因組成的基因文庫,且含有的基因結構完整,不僅含有能編碼蛋白質的編碼序列,還含有非編碼序列;cDNA文庫僅僅是某生物體細胞內提取的部分mRNA為模板,經反轉錄產生cDNA,其所包含的基因不僅數量少,而且每個基因的結構不完整,即基因中沒有啟動子、內含子等結構。獲取目的基因不僅可以從基因文庫中獲取,也可以通過PCR技術進行擴增獲取,部分短小且鹼基序列已知的目的基因還可以通過化學方法合成。基因工程中核心步驟是構建基因表達載體。將目的基因匯入植物受體細胞常用農桿菌轉化法、花粉管通道法;匯入動物受體細胞常用顯微注*法;匯入微生物細胞常用感受態細胞法。
(1)cDNA文庫是通過某種生物發育的某個時期mRNA反轉錄產生的,而這個時期並不是每個基因都進行轉錄,基因組文庫包含該種生物所有的基因,所以cDNA文庫比基因組文庫小。
(2)PCR的原理是DNA雙鏈複製;擴增過程是在較高溫度下進行的,因此需要加入耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)基因表達載體的組成部分中,首端為啟動子,啟動子的作用是RNA聚合酶識別並結合的部位,啟動轉錄過程。
(4)將目的基因匯入植物細胞採用最多的方法是農桿菌轉化法,除此之外還有基因*法、花粉管通道法等。
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題
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