2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠*熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家.綠*熒光蛋白能在藍光或紫...
問題詳情:
2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠*熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家.綠*熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發下發出熒光,這樣藉助GFP發出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況,幫助推斷蛋白質的功能.如圖1為我國首例綠*熒光蛋白(GFP)轉基因複製豬的培育過程示意圖,據圖回答: (1)圖中通過過程①、②形成重組質粒,需要限制*內切酶切取目的基因、切割質粒.限制*內切酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-,限制*內切酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-.在質粒上有酶Ⅰ的一個切點,在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點. ①如圖2所,請畫出質粒被限制酶Ⅰ切割後所形成的黏*末端. ②在DNA連線酶的作用下,上述兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端能否連線?理由是: . (2)過程③將重組質粒匯入豬胎兒成纖維細胞時,採用最多也最有效的方法是 . (3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是 .獲得的轉基因複製豬,可以解決的醫學難題是,可以避免 . (4)目前科學家們通過蛋白質工程製造出了藍*熒光蛋白,黃*熒光蛋白等,採用蛋白質工程技術製造出藍*熒光蛋白過程的正確順序是: (填序號). ①推測藍*熒光蛋白的氨基*序列和基因的核苷* ②藍*熒光蛋白的功能分析和結構設計序列 ③藍*熒光蛋白基因的修飾(合成) ④表達出藍*熒光蛋白.
【回答】
解:(1)①限制酶識別特定的核苷*序列,並在特定的切割位點切割,產生粘*末端.限制酶Ⅰ和Ⅱ切割後產生的粘*末端相同,即均產生GATC序列,因此可以用DNA連線酶連線起來. ②在DNA連線酶的作用下,由於兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端是相同的,因此上述兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端可以連線. (2)將重組質粒匯入動物細胞的方法是顯微注*法. (3)標記基因是為了鑑定受體細胞中是否含有目的基因. (4)蛋白質工程的基本途徑是:從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基*序列→找到相對應的脫氧核苷*序列→相應基因的修飾改造或人工合成→相應的表達. 故*為: (1)① ②可以連線 因為由兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端是相同的 (2)顯微注*技術 (3)為了鑑定受體細胞中是否含有目的基因 發生免疫排斥反應 (4)②①③④
知識點:克隆技術
題型:填空題
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