前不久,一种名为耳念珠菌的多重耐*真菌(超级真菌)在美国多地流行。请回答下列有关问题:(1)实验室在培养皿中培...
问题详情:
前不久,一种名为耳念珠菌的多重耐*真菌(超级真菌)在美国多地流行。请回答下列有关问题:
(1)实验室在培养皿中培养的超级真菌如图所示,其采用的培养方法最可能为____________________,要从超级真菌与其他细菌混杂的一个菌群中将超级真菌纯化,应当使用的培养基除碳源、氮源、水、无机盐、维生素以及必需的生长因子外,还需要添加__________制成选择培养基。
(2)超级真菌的基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用____________________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加__________的抑制剂。
(3)固定化技术包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。假定经过基因工程处理后的超级真菌具有催化某种反应的生物活*,现欲长期使用并保存该超级真菌(突变体X),那么,宜使用的固定化技术是__________,不选用另外两种的理由是____________________。
(4)实验全部结束后需要对所有仪器以及废液进行后续处理。处理玻璃、金属仪器宜用干热灭菌法,此过程的温度为______;处理废液最适宜放置于高压蒸汽灭菌锅中,若未将锅内冷空气排尽,则会出现______________________________的后果。
【回答】
平板划线法 抗生素 不含蛋白酶基因 蛋白酶 包埋法 包埋法适用于固定化细胞,化学结合法与物理吸附法更适合固定酶 160~170℃ 锅内温度达不到预设温度而影响灭菌
【解析】
微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的*作,将聚集的菌种,逐步稀释分散到培养基的表面,后者是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程,常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。
固定化酶、固定化细胞的比较:
固定化酶 | 固定化细胞 | |
酶的种类 | 一种 | 一系列酶 |
制作方法 | 物理吸附法、化学结合法 | 包埋法 |
是否需要营养物质 | 否 | 是 |
缺点 | 不利于催化一系列的酶促反应 | 反应物不宜与酶接近,尤其是大分子物质,反应效率下降 |
优点 | ①既能与反应物接触,又能与产物分离②可以反复利用 | 成本低,*作容易 |
【详解】
(1)培养方法包括平板划线法和稀释涂布平板法,稀释涂布平板法会使菌落在平板上均匀分布,平板划线法有多次划线,每次划线都来自于上一次划线的末端从而实现稀释,由图可知,超级真菌通过平板划线法接种在固定培养基上;超级真菌为多重耐*,故在纯化培养时,需添加抗生素,只有超级真菌能在添加了抗生素的选择培养基上生长。
(2)蛋白质会被蛋白酶降解,为防止蛋白质被降解,在实验中应选用不含蛋白酶基因的大肠杆菌作为受体细胞;在蛋白质纯化的过程中应添加蛋白酶的抑制剂来防止蛋白质的降解。
(3)固定化技术包括包埋法、化学结合法和物理吸附法,现欲长期使用并保存该超级真菌(突变体X),宜使用的固定化技术是包埋法,包埋法更适合固定细胞,而化学结合法与物理吸附法更适合固定酶,真菌属于细胞,故使用包埋法。
(4)处理玻璃、金属仪器宜用干热灭菌法,干热灭菌法常用的温度为160~170℃;处理废液最适宜放置于高压蒸汽灭菌锅中,若未将锅内冷空气排尽,则会出现锅内温度达不到预设温度而影响灭菌的后果。
【点睛】
本题主要考查微生物的培养、固定化技术和灭菌技术等知识点,要求学生掌握固定化细胞和固定化酶所用的方法,灭菌技术过程中的*作等,属于识记理解水平的考查。
知识点:微生物的培养与应用
题型:综合题
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